核酸降解与污染，是高通量组织细胞核酸提取中最常见的两类质量事故。RNA降解会让表达分析失真，DNA污染会让检测结果无法解释。掌握预防要点，比事后补救更重要。本文梳理降解与污染的常见来源，并给出可落地的预防措施。

一、RNA降解的元凶与对策

RNA酶（RNase）广泛存在于环境、皮肤与唾液等来源，是RNA降解的主要原因。对策包括：使用无核酸酶或经处理的一次性耗材；操作时佩戴手套并减少讲话；样本尽量低温、快速处理；选择含有RNase抑制成分的裂解体系，让核酸在裂解阶段即受到保护。此外，用于RNA实验的台面建议定期用去RNA酶试剂处理，设备与耗材也应与DNA实验适当区分。

二、DNA污染的来源与防控

DNA污染主要来自三个方面：样本间的交叉污染、试剂与耗材引入的污染、操作环境中的气溶胶污染。防控手段包括：使用带滤芯的移液吸头；不同样本分区操作，避免同批加样时溅出；设置阴性对照监测污染；RNA提取时，必要时按试剂盒说明进行DNase处理，去除残留基因组DNA。对于多重样本并行的高通量场景，建议每板设置两个以上阴性对照，分散在板的不同位置。

三、组织样本的特有风险

组织样本若反复冻融，核酸损伤会明显加剧；研磨过程产热也可能造成降解。建议将样本分装保存、避免重复冻融，研磨时采用液氮或预冷模块控制温度。对于需要长期保存的组织，分装后-80摄氏度保存，避免样本反复取出。微信号：19115957237

无创采样与样本前处理

四、质检与验证

提取完成后应及时质检：紫外吸收比值判断纯度，电泳观察降解情况，RNA结合完整性指标评估。出现异常时，先排查操作环节，再考虑试剂因素。如果条件允许，可对关键样本复核荧光定量结果，进一步确认产物可用性。

五、操作规范清单

可以归纳为六条：样本尽快处理、耗材无核酸酶、滤芯吸头防污染、低温操作控降解、阴性对照证洁净、质检记录留痕迹。把这些习惯固化到日常操作中，能显著降低质量事故。清单不必一次到位，可逐项落实，并在团队内形成共同的操作约定。

六、从源头到终点的质控意识

质控应该贯穿实验全程，而不只是提取结束后的一个环节。样本接收时记录状态与保存条件；提取过程中同步运行阳性与阴性对照；产物完成后及时质检并留存数据。一旦后续下游实验出现异常，这些记录可以帮助快速定位问题环节。对高通量平台而言，质控数据还可以用来监测批次间趋势，提前发现仪器漂移或试剂变化。

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RNA降解与DNA污染，大多可以通过规范操作加以预防。高通量组织细胞核酸提取的稳定性，本质上来自每一个环节的把控，建议实验室建立并执行标准操作规范。

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